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    western blot檢測
             蛋白印跡(Western blot, WB)是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種試驗方法,是將蛋白質通過SDS-PAGE電泳后,再轉移到雜交膜上,然后通過抗原抗體復合物對特定蛋白質進行特異性檢測的方法。Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。

    樣品準備條件:

    細胞樣品:收集細胞后放入液氮中速凍保存或速凍24 h后轉入-80 °C冰箱保存。

    組織樣品:動物組織一般取材后立即放入液氮中速凍保存,液氮凍存24 h后可轉入-80 °C冰箱保存。

    所有樣品的處理和保存過程中,切忌反復凍融。

    樣品運輸條件:樣品運輸條件根據實驗樣品的處理條件,可以選擇液氮或者干冰運

    您只需提供:

    新鮮且足量的樣品(組織不少于50 mg,細胞不少于106),或提取的總蛋白(≥ 50 μl),檢測蛋白信息,一抗(包括抗體說明書)(若無一抗,可有償使用公司備存抗體或代購)等。

    我們提供

    實驗結果原始膠片,電子版圖片,目的條帶光密度值,完成實驗報告單等。

    Western blot實驗結果范例圖 

    滬公網安備 31010702003365號

    公安部備案號31010702003365

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